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在吸入毒理學(xué)上,有兩個主要方面的重要性日益突出:體外吸入暴露染毒正在減少或取代動物體內(nèi)暴露的重要性,以及更多的科學(xué)實驗需要根據(jù)實際暴露環(huán)境來分析各種暴露因子的重要性。這就需要特殊的暴露技術(shù),培養(yǎng)細胞暴露染毒就是解決了這種科學(xué)實驗發(fā)展要求而誕生的技術(shù)。特別是如今的重點越來越側(cè)重于對吸入氣體化合物及各種復(fù)雜的混合物,例如香煙煙霧、柴油廢氣、環(huán)境氣體對人體健康的影響的研究。在對這些物質(zhì)進行遺傳毒性評價時,通常是基于模型物質(zhì)的混合物和冷凝物的實驗分析。但,在對細胞或細 菌進行自然狀態(tài)下空氣污染物或氣溶膠狀態(tài)下的空氣污染物暴露實驗時,則比較困難,更沒有受到廣泛認可的技術(shù)。 德國Cultex公司研發(fā)人員首先提出了氣液界面暴露染毒的概念,并成功的研發(fā)了Cultex細胞體外暴露染毒系統(tǒng) In vitro exposure 系統(tǒng),目前為全球大部分細胞染毒實驗室提供各種類型設(shè)備。已成為細胞暴露,細胞染毒實驗的重要參考技術(shù)方案。
Cultex細胞體外暴露染毒技術(shù),其靶向明確、實驗周期短、快速高效等特點,不僅可為傳統(tǒng)的動物暴露染毒實驗提供非常重要的參考價值,同時也能夠?qū)崿F(xiàn)動物實驗所無法解決的問題,甚至在一定領(lǐng)域有取代動物體內(nèi)暴露染毒實驗的趨勢,在藥理、毒理、醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)領(lǐng)域有都著重要的應(yīng)用。
氣液界面暴露技術(shù)結(jié)構(gòu)原理:
傳統(tǒng)細胞體外暴露方法是將需要暴露的氣溶膠物質(zhì)溶于培養(yǎng)液,然后到達細胞表面,通過細胞與培養(yǎng)液相互作用的方式進行進行染毒實驗。對于肺內(nèi)上皮細胞,這種方式并不符合真實的體內(nèi)暴露環(huán)境,且暴露效率較低。特別是對于含顆粒物的氣體來說,無法通過這種方式進行體外暴露。
A、細胞上面的培養(yǎng)液;
B、微孔膜中培養(yǎng)的細胞;
C、細胞下面的培養(yǎng)液。 特點:低靈敏度;暴露物質(zhì)與培養(yǎng)液相互作用
A、細胞上面的實驗氣體或氣溶膠; B、微孔膜中培養(yǎng)的細胞; C、細胞下面的培養(yǎng)液
CULTEX®體外暴露模塊是一種以Transwell膜技術(shù)為技術(shù)為基礎(chǔ),實現(xiàn)在體外環(huán)境下,氣溶膠/顆粒物等物質(zhì)對體外培養(yǎng)的細胞,進**-液界(真實模擬體內(nèi)暴露環(huán)境)暴露的細胞染毒設(shè)備。細胞種在Transwell膜上,膜下方是細胞生長必須的培養(yǎng)基,膜上方,細胞在氣-液界面與恒流的氣體或顆粒物進行接觸。 主要特點: 1、 耐高溫高壓材料制造,便于清洗或**,無實驗物質(zhì)殘留致使交叉污染; 2、 在氣液界面直接暴露,暴露氣體無需透過培養(yǎng)基; 3、 模擬真實環(huán)境; 4、 暴露期間完全保持細胞活力; 5、 底部培養(yǎng)基避免細胞脫水; 6、 可循環(huán)提供各種培養(yǎng)液; 7、 避免細胞**化合物聚集; 8、 可對細胞進行形態(tài),生化組成及遺傳學(xué)終點等方面進行評價分析。 系統(tǒng)結(jié)構(gòu):
Figure : Schematic assembly of the experimental setup for the exposure at the air-liquid interface. 注:此圖是統(tǒng)全結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)模式圖。其中,模塊類型,氣溶膠發(fā)生器類型,過濾器類型等根據(jù)實驗需求,請咨詢佰樂良成科技細胞暴露細胞染毒專業(yè)工程師。